Как сдать анализы?

Где сдать анализы?

Региональные партнеры

Версия для печати

Хламидии, и их роль в репродуктивной патологии

Лабораторная диагностика хламидийной инфекции в CMD

Метод NASBA (Nucleic Acid Sequence-Based Amplificaition) - реакция транскрипционной амплификации

Сдать анализ

000001 Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение рибосомальной РНК методом NASBA, определение ДНК (соскоб и др.).

Материал для исследования: кровь (сыворотка)

Стоимость исследования: 995 р.

Срок исполнения: 2 р. д.

Мишенью для NASBA служит РНК, содержащаяся в рибосомах хламидий (рибосомальная РНК). В одной клетке возбудителя содержится от нескольких тысяч до нескольких десятков тысяч рибосом. Таким образом методом NASBA можно выявить возбудителей (РНК хламидии) даже в тех случаях, когда их количество мало и недостаточно для выявления методом ПЦР. Кроме того, РНК - нестабильный материал, достаточно быстро деградирующий при гибели и разрушении клеток микроорганизмов (например, в результате лечения). NASBA дает возможность подтвердить текущую хламидийную инфекцию (наличие жизнеспособных микроорганизмов) и оценить результаты проведенной терапии. Также метод NASBA можно использовать как подтверждающий тест результатов ПЦР, особенно на фоне отсутствия выраженных клинических проявлений хламидийной инфекции.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Сдать анализ

010001Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение ДНК (соскоб и др.)

Стоимость исследования: 175 р.

Срок исполнения: 3 р. д.

Мишенью для ПЦР служит ДНК хламидии. Высокие аналитическая чувствительность ПЦР (85-98%) и специфичность (около 100%) дают возможность обнаружения минимального количества микроорганизмов в исследуемом материале, что позволяет выявить максимальное число инфицированных лиц, а также исследовать материал, полученный неинвазивным путем (мочу, отделяемое влагалища и др.).

Серологические методы диагностики

Сдать анализ

041401 Хламидия (Chlamydia trachomatis), полуколичественное определение антител класса IgG

Материал для исследования: кровь (сыворотка)

Стоимость исследования: 380 р. (в режиме CITO 760 р.)

Срок исполнения: 2 р. д. (в режиме CITO 6 ч.)

Выявление антител (иммуноглобулинов) является показателем реакции иммунной системы человека на контакт с возбудителем. Обнаружение антител класса IgG (поздних) отражает имевшийся контакт с хламидиями, но не позволяет дифференцировать перенесенную в прошлом хламидийную инфекцию от текущей.

Для оценки наличия текущей хламидийной инфекции (или её реактивации) необходимо определение антител класса IgG в сочетании с IgА-антителами. Возможно исследование титра IgG в парных сыворотках (с интервалом в 2 недели). Нарастание в динамике титров IgG - диагностический маркер инфекционного процесса, вызванного хламидией. Однако окончательное установление этиологии заболевания требует прямого определения возбудителя (методами ПЦР, NASBA).

Сдать анализ

041402 Хламидия (Chlamydia trachomatis), полуколичественное определение антител класса IgA

Материал для исследования: кровь (сыворотка)

Стоимость исследования: 395 р. (в режиме CITO 790 р.)

Срок исполнения: 2 р. д. (в режиме CITO 6 ч)

Выявление антител (иммуноглобулинов) является показателем реакции иммунной системы человека на контакт с возбудителем. Антитела класса IgA выявляются как в случае острой хламидийной инфекции, так и в случае реинфекции. Однако отсутствие IgA не означает отсутствие хламидийной инфекции. Хламидии - слабые иммуногены, нарастание уровня антихламидийных антител происходит медленнее по сравнению с многими другими инфекциями, поэтому при ранней и неосложненной хламидийной инфекции определение антител часто бывает малоинформативно. Окончательное установление этиологии заболевания требует прямого определения возбудителями ПЦП, NASBA).

Сдать анализ

041405 Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение антител класса IgM

Материал для исследования: кровь (сыворотка)

Стоимость исследования: 380 р. (в режиме CITO 760 р.)

Срок исполнения: 2 р. д. (в режиме CITO 6 ч.)

Выявление антител (иммуноглобулинов) является показателем реакции иммунной системы человека на контакт с возбудителем. Антитела класса IgM (ранние) в ходе иммунного ответа вырабатываются первыми. Их обнаружение позволяет диагностировать острый инфекционный процесс, но их отсутствие вовсе не означает отсутствие хламидийной инфекции. Хламидии - слабые иммуногены, нарастание уровня антихламидийных антител происходит медленнее по сравнению с многими другими инфекциями. Именно поэтому исследование ранних антител класса IgM часто бывает малоинформативно. Окончательное установление этиологии заболевания требует прямого определения возбудителя (методами ПЦР, NASBA).

• Общие сведения о заболеваниях, вызываемых хламидиями
• Распространенность хламидийной инфекции
• Роль хламидийной инфекции в репродуктивной патологии
• Лабораторная диагностика хламидийной инфекции
• Культуральный метод
• Иммуноморфологические методы
• Серологические методы
• Молекулярно-биологические методы
• Заключение

Общие сведения о заболеваниях, вызываемых хламидиями

Хламидии — это облигатные внутриклеточные паразиты - т. е. они могут размножаться только внутри клеток организма хозяина в специализированных вакуолях, называемых включениями.

Всем хламидиям свойственен своеобразный жизненный цикл, состоящий из внеклеточной инфекционной формы существования — элементарного тельца (ЭТ), и внутриклеточной репликативной (способной к размножению) формы — сетчатого (ретикулярного) тельца (СТ). Все хламидии обладают склонностью к латентному существованию или к персистенции.

Хотя в настоящее время единого мнения о наиболее приемлемой таксономической классификации этих микроорганизмов не выработано, обычно их относят к порядку Chlamydiales, в котором имеется только одно семейство — Chlamydiaceae, и один род — Chlamydia. В этом роду в настоящее время выделяют четыре вида:

• Chlamydia pecorum
• Chlamydia psittaci
• Chlamydia trachomatis
• Chlamydia pneumoniae.

Все они, за исключением C. pecorum, вызывают заболевания у человека.

Несмотря на относительное единообразие жизненного цикла, геномов и физиологических свойств, хламидии значительно различаются по тропизму к организмам и тканям-хозяевам, путям передачи, патогенности.

EP = внематочная беременность; ВЗОТ = воспалительные заболевания органов таза; SARA = реактивный артрит при инфекциях, передаваемых половым путем; TFI = трубное бесплодие.

В этой статье мы более подробно коснемся вопроса урогенитальной хламидийной инфекции (раньше для этого состояния использовался термин урогенитальный хламидиоз), т.к. это заболевание имеет большое социальное значение, являясь одной из основных причин бесплодия!

Распространенность хламидийной инфекции

Урогенитальные инфекции, вызываемые C. Trachomatis (урогенитальный хламидиоз), являются самыми распостраненными среди инфекций, передаваемых половым путем (ИППП). По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) во всем мире ежегодно регистрируется около 90 млн. новых случаев хламидийной инфекции (ХИ) и, по-видимому, это лишь малая часть реально инфицированных лиц. Наиболее часто хламидийной инфекции подвержена сексуально активная часть населения в возрасте 17-25 лет. Среди сексуально активных клинически здоровых женщин инфицированность хламидиями составляет 8-40%, в среднем около 15%, среди мужчин приблизительно 10%. Характерное для хламидиоза продолжительное бессимптомное течение способствует передаче возбудителя другим половым партнерам. Восприимчивость к урогенитальному хламидиозу приближается к 100%, особенно высока она у лиц, страдающих иммунодефицитом любого генеза.

У беременных хламидиоз встречается с частотой 10-12%. Хламидийная инфекция во время беременности может привести к преждевременным родам, выкидышам, мертворождению, гипотрофии плода.

Согласно ежегодным отчетам CDC (Центр по контролю и профилактике заболеваний США - Centers for Disease Control and Prevention) заболеваемость хламидийной инфекцией (хламидиозом) неуклонно возрастает.

Нередко отмечается сочетание хламидийной и гонококковой инфекции.

Симптомы хламидиоза у мужчин и у женщин

Особенность течения хламидиоза - отсутствие какой-либо выраженной клинической симптоматики с момента инфицирования. Симптомы хламидиоза невыражены и неспецифичны: аналогичные проявления могут наблюдаться и при других урогенитальных инфекциях. Какие-либо манифестные клинические проявления часто наблюдаются только в тех случаях, когда имеет место ассоциированная инфекция.

Важным свойством возбудителя хламидиоза является высокая способность к персистенции. Персистенция - это долговременная ассоциация хламидий с клеткой-хозяином, при которой хламидии находятся в жизнеспособном состоянии, однако защитные механизмы организма человека не позволяют хламидиям перейти в стадию активного роста и размножения. Персистенция не всегда проявляет себя клинически.

Симптомы хламидиоза у женщин: легкое покалывание, жжение или зуд при мочеиспускании, умеренные боли внизу живота и паховой области, незначительные выделения из влагалища во время полового акта или между менструациями, небольшие кровотечения из половых путей, конъюктивит, возможно повышение температуры до субфебрильных значений. В целом у 75% женщин хламидиоз в острой фазе протекает бессимптомно.

Симптомы хламидиоза у мужчин: жжение или зуд при мочеиспускании, умеренные боли в области мошонки, гиперемия вокруг наружного отверстия мочеиспускательного канала, небольшие кровянистые выделения в конце мочеиспускания или во время эякуляции, конъюктивит, возможно повышение температуры до субфебрильных значений. У 25-30% мужчин симптомы хламидиоза отсутствуют, и инфекция долгое время оставаться остается нераспознанной.

Именно продолжительное бессимптомное течение обусловливает широкое распространение хламидийной инфекции и частое развитие осложнений. Достаточно часто хламидиоз выявляют лишь при массовом профилактическом обследовании или при развитии клинических проявлений инфекции у полового партнера.

Наиболее частые осложнения:

У мужчин – уретрит, проктит, эпидидимит (воспаление придатка яичка).

У женщин – эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, цервицит и другие воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ).

У новорожденных, при прохождении родовых путей инфицированной матери может развиваться хламидийная инфекция в форме конъюнктивита новорожденных и пневмонии, которая может давать осложнения и в более старшем возрасте. Приобретенные в родах хламидии могут длительно находиться в носоглотке, урогенитальном тракте или прямой кишке ребенка до 2-х лет и более.

Самым тяжелым осложнением «восходящего» хламидиоза является болезнь Рейтера, которая возникает у людей с генетической предрасположенностью и характеризуется триадой клинических проявлений - артритом, уретритом и конъюнктивитом. Большую роль в развитии болезни Рейтера играют нарушения в иммунной системе, возникшие в связи с формированием очага хронического хламидийного воспаления. Мужчины болеют в 20 раз чаще, чем женщины.

Конечно, острая хламидийная инфекция далеко не всегда переходит в хроническую форму и приводит к тяжелым последствиям. Чаще всего она заканчивается выздоровлением (возможно и самоизлечение). Но клиническое и социальное значение хламидийной инфекции заключается не столько в развитии острой инфекции, которая в большинстве случаев протекает малосимптомно, сколько в развитии различных осложнений. Ведь очень часто манифестация клинических проявлений хламидийной инфекции происходит только на стадии осложнений, что приводит к поздней диагностике. А лечение пациентов с осложненными формами хламидийной инфекции, как правило, более длительное и не всегда позволяет добиться желаемого результата.

Исходя из вышесказанного, очевидно, что раннее выявление хламидийной инфекции позволяет предотвратить не только ее дальнейшее распространение и передачу потомству, но и снизить риск развития тяжелых осложнений нарушающих репродуктивную функцию. При любом подозрении на наличие хламидийной инфекции необходимо сдать анализы на хламидиоз.

Учитывая отсутствие специфических клинических проявлений, позволяющих поставить этиологический диагноз, а также высокую частоту смешанных инфекций, вызванных сочетанием нескольких патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов, становится понятным, насколько важны лабораторные методы в диагностике хламидийной инфекции.

Анализы на хламидии в CMD

Роль хламидийной инфекции в репродуктивной патологии

Длительное течение с невыраженной симптоматикой создает благоприятные условия для распространения хламидийной инфекции с нижних отделов урогенитального тракта на органы малого таза.

У женщин восходящая хламидийная инфекция может привести к развитию воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ): эндометриту, сальпингиту, сальпингоофориту, перигепатиту (синдрому Фитц-Хью-Куртиса), уретриту, цервициту, проктиту (воспалению слизистой оболочки прямой кишки). ВЗОМТ часто являются причиной серьезных нарушений репродуктивной функции. Женщины с ВЗОМТ в анамнезе имеют 7-10-кратный риск развития эктопической беременности. Беременность называется эктопической (или внематочной), если имплантация плодного яйца произошла вне полости матки. Наиболее частое место имплантации - маточные трубы (98%) – трубная беременность; реже - яичник, рудиментарный рог матки, брюшная полость.

У 40% таких женщин беременность в будущем невозможна, а у 60% повторно забеременевших женщин в 12% случаев снова развивается эктопическая беременность. У 15-20% повторно забеременевших возможен спонтанный аборт.

Примерно у 50% женщин с бесплодием, этиологическим фактором является хламидийная инфекция.

Лабораторная диагностика хламидийной инфекции

Общая мировая практика направлена на выявление максимального числа инфицированных лиц, прежде всего на ранних сроках инфекции. А также рекомендует лечение всех пациентов с установленной хламидийной инфекцией и их половых партнеров независимо от наличия и выраженности клинических проявлений.

При этом этиологический диагноз урогенитальной хламидийной инфекции устанавливается только при обнаружении возбудителя – C. trachomatis с помощью лабораторных методов.

1. Культуральный метод

Долгое время являлся «золотым стандартом» диагностики хламидийной инфекции. Несмотря на то, что указанный метод позволяет выделить возбудитель в чистой культуре, что является наиболее бесспорным доказательством инфекции, с точки зрения рутинного лабораторного исследования культуральный метод имеет ряд недостатков:

• достаточно сложный и трудоемкий процесс культивирования, требующий очень высокой квалификации персонала;
• необходимо строгое выполнение условий хранения и транспортировки биологического материала, обеспечивающих сохранение жизнеспособности и инфекционных свойства возбудителя;
• предъявляет высокие требования к биологической безопасности лабораторий.

Учитывая вышесказанное, является очевидным, что для скрининговых исследований этот метод не пригоден, к тому же, будучи методом с практически абсолютной специфичностью, как показали результаты многочисленных экспериментов, диагностическая чувствительность культурального метода не превышает 90%.

Низкая чувствительность и достаточно высокая стоимость одного анализа привели к сокращению использования культурального метода в США, Великобритании и других странах.

2. Иммуноморфологические методы

Наибольшее распространение из них в лабораторной практике получили методы прямой и непрямой иммунофлуоресценции (ПИФ и нПИФ), основанные на выявлении структур, содержащих хламидийные антигены, как правило, это - эпителиальные клетки инфицированные хламидиями или элементарные тельца хламидий.

Несмотря на то, что выполнение всей процедуры не требует дорогостоящего оборудования и большого количества манипуляций, анализ и интерпретация результатов требует хорошо обученного квалифицированного персонала, значительного времени для подробного и тщательного изучения каждого полученного препарата.

Интерпретация результатов ПИФ в значительной степени зависит от качества получения материала, в первую очередь из цервикального канала, который в норме содержит достаточное количество слизи. Неправильно полученный материал, без достаточного количества эпителиальных клеток, с избытком слизи может снизить диагностическую чувствительность в 10 раз.

Диагностическая чувствительность иммуноморфологических методов находится в пределах 50-80%.

3. Серологические (иммунологические) методы

В отличие от выше описанных методов, направленных на выявление самого возбудителя, серологические методы основаны на выявлении циркулирующих в периферической крови антихламидийных антител разных классов – иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM, т.е. являются непрямыми.

Обнаружение IgG отражает имевшийся контакт с хламидиями и не позволяет дифференцировать перенесенную хламидийную инфекцию от текущей. Кроме того, у новорожденных IgG в крови имеют, как правило, материнское происхождение (т.е. от матери ребенку передается не сама инфекция, а антитела к ней).

Антитела класса IgA обнаруживают как в случае острого инфекционного процесса, так и в случае реинфекции. Но их отсутствие не означает отсутствие хламидийной инфекции.

Чтобы оценить наличие текущего инфекционного процесса или его реактивации необходимо проводить диагностику IgG-антител в сочетании с IgА-антителами, или проводить исследование в парных сыворотках (определение титра антител класса IgG в двух последовательных образцах, взятых через 2 недели).

В лаборатории CMD можно сдать следующие анализы на хламидиоз с использованием серологических методов диагностики:

041401 Хламидия (Chlamydia trachomatis), полуколичественное определение антител класса IgG

041402 Хламидия (Chlamydia trachomatis), полуколичественное определение антител класса IgA

Антитела класса IgM появляются первыми в ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента. Их обнаружение позволяет диагностировать острую инфекцию, но их отсутствие не означает отсутствие хламидийной инфекции.

041405 Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение антител класса IgM

Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение антител класса IgM

Хламидии являются слабыми иммуногенами, и нарастание уровня антихламидийных антител происходит гораздо медленнее по сравнению с другими инфекциями, поэтому при ранней и неосложненной инфекции эти исследования малоинформативны. В этом случае даже определение ранних антител класса IgM чаще всего не эффективно.

Ценность результатов серологических исследований возрастает при изучении этиологии ВЗОМТ, трубного бесплодия, особенно когда отсутствует возможность использования прямых методов диагностики. В этом случае, высокие титры антихламидийных антител, нарастающие в динамике могут служить диагностическим маркером патологического процесса, вызванного C.trachomatis. Однако окончательное установление этиологии заболевания требует прямого доказательства наличия возбудителя в очаге.

4. Молекулярно-биологические методы диагностики хламидийной инфекции (методы амплификации нуклеиновых кислот – МАНК)

Это методы прямого обнаружения хламидии в биологическом материале – что является наиболее бесспорным доказательством инфекции и основанием для постановки этиологического диагноза. Мишенью для этих методов диагностики служит короткий участок генома (ДНК или РНК), уникальный для того или иного микроорганизма. МАНК обладают наибольшей на сегодняшний день аналитической чувствительностью, что позволяет добиться обнаружения даже минимальных количеств микроорганизмов в исследуемом материале, и как следствие, выявить максимальное число инфицированных лиц, включая тех, у которых инфекция протекает с низкой плотностью обсемененности возбудителем.

Наибольшее распространение получил метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) - это один из методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК). ПЦР в очень упрощенном виде воспроизводит процесс удвоения генетического материала – ДНК при клеточном делении.

Чувствительность этого метода находится в пределах 85-98% - это наибольшая на сегодняшний день аналитическая чувствительность, которая позволяет добиться обнаружения даже минимальных количеств микроорганизмов в исследуемом материале, и как следствие, выявить максимальное число инфицированных лиц, включая тех, у которых инфекция протекает с низкой плотностью обсемененности возбудителем. Специфичность ПЦР близка к 100%.

Благодаря высокой чувствительности и специфичности стало возможным исследовать материал, получаемый неинвазивным путем (мочу, отделяемое влагалища).

Кроме того, к дополнительным преимуществам метода ПЦР следует отнести отсутствие столь высоких, как в случае бактериологических исследований, требований к условиям хранения и транспортировки биологического материала и необходимости в сохранении жизнеспособности возбудителей.

Сдать анализ на хламидии 010001 Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение ДНК (соскоб и др.)

Еще один метод амплификации нуклеиновых кислот, который сравнительно недавно появился в России – NASBA (Nucleic Acid Sequence-Based Amplificaition) - реакция транскрипционной амплификации.

Мишенью для NASBA служат молекулы РНК рибосом (рибосомальные РНК) микроорганизмов, что дает целый ряд преимуществ перед ПЦР.

Во-первых, в одной клетке хламидии содержится от нескольких тысяч до нескольких десятков тысяч рибосом. Для сравнения: даже многокопийные участки ДНК, используемые в качестве мишени для ПЦР, не превышают двух десятков на бактериальную клетку. Тем самым с помощью NASBA можно выявлять возбудителей и в тех случаях, когда их количество слишком мало и недостаточно для выявления методом ПЦР!

Во-вторых, в то время как ДНК – достаточно стабильный материал и обнаружение ДНК еще не означает наличие жизнеспособных микроорганизмов, РНК – наоборот крайне нестабильный материал и достаточно быстро деградирует при гибели и разрушении клеток микроорганизмов. Это дает возможность не только более правильно судить о наличии текущей инфекции, но и более точно и надежно оценивать результаты проведенного лечения.

Наконец, поскольку, метод ПЦР обладает более высокой аналитической чувствительностью по сравнению с другими лабораторными методами, то использование этих методов для подтверждения результатов ПЦР не всегда корректно. В этом случае NASBA может использоваться как подтверждающий тест результатов ПЦР, особенно на фоне отсутствия клинических признаков инфекции.

Сдать анализ на хламидии 000001 Хламидия (Chlamydia trachomatis), определение рибосомальной РНК методом NASBA, определение ДНК (соскоб и др.).

Заключение

В заключение следует отметить, что в нашей стране сложилась благоприятная ситуация, позволяющая благодаря новым технологиям, таким как ПЦР и NASBA поставить диагностику хламидийной инфекции на качественно более высокий уровень. Высокая чувствительность этих методов, позволяет исследовать материал, получаемый неинвазивным путем (моча, мазки из влагалища).

Исходя из вышесказанного, становится очевидным, что именно МАНК - методы амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР и NASBA) являются наиболее оптимальными для скринингового обследования.

Широкое внедрение данных технологий в масштабе всей страны позволит наладить программу раннего выявления хламидийной инфекции, обеспечить мониторинг результатов проводимого лечения, и тем, самым снизить риск развития тяжелых осложнений.

Стоимость анализа на хламидиоз зависит от применяемого метода лабораторной диагностики. Сроки исполнения так же влияют на стоимость анализа на хламидиоз. Некоторые анализы могут быть выполнены в режиме CITO (срочно). Узнать точную стоимость выбранного анализа на хламидиоз вы можете на нашем сайте.

Анализы на хламидиоз можно сдать как в Центральном офисе лаборатории CMD (ул. Новогиреевская, 3а), так и во всех офисах партнеров CMD.