Комплексное определение метаболитов эстрогена и прогестерона в суточной моче методом ВЭЖХ-МС/МС (10 параметров, расчет соотношений): эстрадиол, эстрон, эстриол, 16а-ОНЕ1, 2-ОНЕ2, 2-ОНЕ1, 2-ОМеЕ1, 4-ОМеЕ1, 4-ОНЕ1, прегнандиол в Бисерово
Метод исследования
- Высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС)
Масс-спектрометрия – это высокочувствительный метод анализа широкого спектра клинически значимых аналитов. Метод основан на непосредственном определении частиц вещества, что определяет более высокую точность и селективность по сравнению с иммунохимическими методами. Сочетание МС с высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ-МС) или газовой хроматографией (ГХ-МС) позволяет провести одновременный количественный анализ различных соединений в одном биоматериале.
Определение эстрогенов и метаболита прогестерона в суточной моче используется для оценки общей суточной секреции гормонов без влияния циркадных колебаний. Метаболиты эстрогенов в моче и их соотношения рассматриваются в качестве маркеров для оценки риска онкологических процессов, так как комплексное их определение даёт более подробную информацию о механизмах нарушения на разных этапах инактивации эстрогенов. Масс-спектрометрии позволяет измерить низкие концентрации гормонов в биоматериале.
Эстрогены
Эстрогены отвечают за развитие женских половых органов и развитие вторичных половых признаков, позитивно влияют на костную ткань, снижают риск ишемической болезни сердца и др. Эстрогены, циркулирующие в плазме, представлены эстроном (Е1), эстрадиолом (Е2) и эстриолом (Е3). Эстрадиол является самым сильным эстрогеном. Примерно 95% эстрадиола продуцируется в яичниках, меньше в надпочечниках и периферических тканях. Эстрон преобладает в постменопаузе. А эстриол практически весь образуется в плаценте во время беременности и используется для оценки течения беременности и развития плода.
Метаболиты эстрогенов
Эстрогены в печени подвергаются двухфазовой трансформации с образованием метаболитов, которые рассматриваются в качестве маркеров онкологических процессов.
В результате первой фазы трансформации эстрогенов образуются гидроксилированные метаболиты, имеющие разную эстрогенную активность и разную токсичность.
В результате второй фазы детоксикации эстрогенов происходят реакции метилирования, сульфатирования и глюкуронирования и образование неактивных форм.
Примерная схема метаболизма эстрогенов
В лабораторной диагностике используются 6 метаболитов эстрогена и расчетные коэффициенты, отражающие активность I и II фаз трансформации.
| Метаболиты I фазы (реакция гидроксилирования) | |
|---|---|
|
2-гидроксиэстрон (2-ОНЕ1) 2-гидроксиэстрадиол (2-ОНЕ2) |
Действуют как антиэстрогены. Ассоциированы с низким риском развития опухолей. |
| 4-гидроксиэстрон (4ОНЕ1) | Высокая эстрогенная активность. Стимулируют усиленную митотическую активность и ассоциированы с развитием эстрогензависимых опухолей. |
| 16α-гидроксиэстрон (16α-OHE1) | |
| Метаболиты II фазы (реакция метилирования) | |
|---|---|
|
2-метоксиэстрон (2-OMeE1) 4-метоксиэстрон (4-OMeE1) - КОМТ-путь (при участии фермента катехол-О-метилтрансферазы)
|
Неактивные формы эстрогенов. Свидетельствуют об эффективном процессе элиминации из организма «опасных» гидроксиметаболитов эстрогена. |
| Коэффициенты | Интерпретация |
|---|---|
| (2-OHE1+2-OHE2)/16α-OHE1 | Коэффициент «2/16». Коэффициент «2/16» меньше 2,0 связывают с повышенным риском развития СПКЯ, эндометриоза, онкологических заболеваний. Коэффициент больше 2,0 связывают с низким риском онкологической патологии. |
| 2-OMeE1/2-ОНЕ1 | Коэффициенты метилирования. Отражают I и II фазы детоксикации эстрогенов. Понижение значения может свидетельствовать о повышенном риске онкологической патологии. |
| 4-OMeE1/4ОНЕ1 | |
| 2-ОНЕ1/2-OMeE1 |
Коэффициенты метилирования. Отражают I и II фазы детоксикации эстрогенов. Повышение значений может свидетельствовать о повышенном риске опухолевых процессов. |
| 4ОНЕ1/4-OMeE1 |
Прегнандиол – основной метаболит прогестерона. Его уровень в моче коррелирует с уровнем прогестерона в крови: повышение концентрации отмечается во вторую (лютеиновую) фазу цикла и во время беременности. Небольшие концентрации определяются у женщин в менопаузе и у мужчин.
Показания
- Расширенная оценка профиля эстрогенов при нарушениях менструального цикла, мониторинге заместительной терапии.
- Оценка риска развития новообразований, например, при наличии членов семьи с онкологической патологией в анамнезе.
Код в номенклатуре медицинских услуг (Приказ МЗ РФ № 804н от 13.10.2017 г): A09.28.023
Биоматериал
Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:
- Моча (суточная)
Подготовка к исследованию
Для оценки уровня метаболитов эстрогенов у женщин репродуктивного возраста с устоявшимся менструальным циклом рекомендуется сдавать мочу в лютеиновую фазу цикла. Проведение исследования в другие фазы цикла определяет лечащий врач.
Накануне и в день сбора требуется соблюдать обычный питьевой режим (1,5-2 л в сутки).
Необходимо приготовить две сухие чистые ёмкости для сбора мочи: №1 объёмом около 1 литра, №2 объемом не менее 3 литров. И контейнер пластиковый универсальный, 60 мл. Консервант для сбора суточной мочи, лимонная кислота 15г (можно взять предварительно в офисе вместе с контейнером или приобрести в магазине пищевую лимонную кислоту промышленной фасовки, массой 15 г.).
Перед сбором мочи провести тщательный туалет наружных половых органов.
- Первую утреннюю порцию мочи не собирать (вылить в унитаз). Зафиксировать время мочеиспускания. Например, 20.10.2022г. в 07:00.
- Добавить лимонную кислоту в ёмкость №2.
- Вторую и последующие порции мочи собирать, используя ёмкость №1 и осторожно переливать в ёмкость №2.
- Необходимо перемешивать содержимое каждый раз, покачивая ёмкость №2, плотно закрыв её крышкой.
- Не производить мочеиспускание напрямую в ёмкость №2.
- Ёмкость №2 должна храниться в холодильнике при температуре +2+8⁰С.
- Сбор мочи завершается следующим утром, примерно через 24 часа от начала сбора (21.10.2022г. в 7:00).
Внимание! Если хотя бы одна из порций мочи не была собрана в ёмкость №2, то вся моча выливается и сбор начинается заново.
После завершения сбора измерить объем собранной мочи в мл (обязательно указать при регистрации), тщательно перемешать и отлить примерно 50 мл в контейнер пластиковый универсальный. Крышку контейнера плотно закрыть. Доставка образца в медицинский центр - в течение 1-2 часов по окончании сбора мочи при температуре +2+8 С, с указанием диуреза (объёма собранной мочи). Транспортировку в медицинский офис осуществлять в термосе с кубиками льда или хладагентами.
Референсные значения (вариант нормы), суточная моча, мкг/сут:
Женщины:
-
Эстрадиол: 0.000 - 45.000;
-
Эстрон: 0.900 - 46.000;
-
Эстриол: 0.000 - 130.000;
-
Прегнандиол: 0.000 - 6140.000;
-
16а-гидроксиэстрон: 0.200 - 7.800;
-
2-гидроксиэстрадиол: 0.030 - 2.200;
-
2-гидроксиэстрон: 0.200 - 30.100;
-
2-метоксиэстрон: 0.300 - 9.000;
-
4-метоксиэстрон: не определено;
-
4-гидроксиэстрон: 0.050 - 2.630;
-
2-OMeE1 / 2-ОНЕ1: 0.200 - 0.650;
-
2-OHE1+2-OHE2 / 16а-ОНЕ1: 1.600 - 7.700;
-
2-метоксиэстрон (2-ОМеЕ1) / 2-гидроксиэстрон (2-ОНЕ1): 0.200 - 0.650;
-
2-гидроксиэстрон (2-ОНЕ1) / 2-метоксиэстрон (2-ОМеЕ1): 0.660 - 3.340;
-
4-метоксиэстрон (4-ОМеЕ1) / 4-гидроксиэстрон (4-ОНЕ1): не определено.
Мужчины: референсные значения не валидированы.
Комментарий:
Референсные значения валидированы для женщин.
16а-гидроксиэстрон (16а-ОНЕ1), мкг/сут:
- Лютеиновая фаза 1.8 - 7.8; постменопауза 0.2 - 3.0.
2-гидроксиэстрадиол (2-ОНЕ2), мкг/сут:
- Лютеиновая фаза 0.45 - 2.20; постменопауза 0.03 - 0.54.
2-гидроксиэстрон (2-ОНЕ1), мкг/сут:
- Лютеиновая фаза 3.2 - 30.1; постменопауза 0.2 - 5.2.
2-метоксиэстрон (2-ОМеЕ1), мкг/сут:
- Лютеиновая фаза 1.0 - 9.0; постменопауза 0.3 - 3.6.
4-гидроксиэстрон (4-ОНЕ1), мкг/сут:
- Лютеиновая фаза 0.35 - 2.63; постменопауза 0.05 - 1.0.
Прегнандиол, мкг/сут:
- Фолликулярная фаза 0 - 2500, лютеиновая фаза 1450 - 6140; постменопауза 200 - 1000.
Эстрадиол, мкг/сут:
- Фолликулярная фаза 1.0 - 23.0, овуляторная фаза 4.0 - 45.0, лютеиновая фаза 2.0 - 7.8; менопауза 0 - 3.5.
Эстриол, мкг/сут:
- Фолликулярная фаза 3.0 - 48.0, овуляторная фаза 20 - 130, лютеиновая фаза 7.0 - 29.7; менопауза 0 – 7.
Эстрон, мкг/сут:
- Фолликулярная фаза 2.0 - 39.0, овуляторная фаза 11 - 46, лютеиновая фаза 4.7 - 27.6; менопауза 0.9 - 6.5.
Суммарный показатель из концентраций эстрона, эстрадиола и эстриола, мкг/сут:
- Фолликулярная фаза 7.0 - 110, овуляторная фаза 38 - 221, лютеиновая фаза 14.7 - 61.9; постменопауза 1.0 - 17.0.
- Код:
-
060017
